<form id="jl9dl"></form>
      <menuitem id="jl9dl"><rp id="jl9dl"></rp></menuitem>

        <strike id="jl9dl"></strike>

        <span id="jl9dl"><pre id="jl9dl"><ol id="jl9dl"></ol></pre></span>

          <strike id="jl9dl"></strike>

          您好!歡迎訪問上海滬崢生物科技有限公司網站!
          咨詢熱線

          15001863771

          當前位置:首頁 > 技術文章 > 如何看懂流式結果圖

          如何看懂流式結果圖

          更新時間:2019-08-30      點擊次數:10714

          流式結果圖有4種類型,分別為:1. 直方圖  2.散點圖  3. 等高線圖  4.密度圖

          下面一一為大家介紹

          1. 直方圖(Histograms)

          a.橫坐標代表熒光信號或散射光信號相對強度,可以是線性或對數坐標。

           

           

           

           

           

          b.縱坐標一般是相對細胞數。

          直方圖適用于分析處理周期(如下圖)

           

           

          直方圖分析數據注意事項:

          ① 不能比較不同標記之間的表達量。如一號樣本單標記CD133、二號樣本單標記CD44,那么CD133與CD44表達量不能用直方圖進行比較。

          ② 直方圖的形狀(直方圖的高度及寬度)取決于儀器的類型、處理軟件和樣本

          ③檢測目的細胞非常少(即檢測的細胞在一個細胞群體中所占的比例特別少),因此需要統計大量的數據,直方圖將會將該稀有細胞覆蓋,如下圖散點圖中的P2門為CD16陰性群體,但在直方圖中則幾乎看不出來,所以此時散點圖為展示數據方式。

           

           

          2. 散點圖(Dot plots)

          散點圖是雙變量圖的基本圖形,相對于單參數直方圖其分析通量更高,同時也能更好觀察到較小比例細胞群,參見直方圖注意事項2,另外散點圖中設門后,可以賦予門控顏色,便于觀察門控細胞群在其他圖中的分布,比如下圖只賦予淋巴細胞門紅色,則可以觀察到淋巴細胞中在散射光圖中的分布。

           

           

           

           

           

          橫坐標和縱坐標都是光信號,十字門左下角是雙陰性群,右下角和左上角是單陽群,右上角是雙陽群。散點圖上的每一個點可以代表某一個細胞的信息。

           

          但是散點圖在顯示足夠多events下的細胞分群上缺乏細節,如下圖,流式儀器記錄的events達到50000以上時,CCR7的陽性群與陰性群已經沒有明顯界限,但當用等高線圖或者密度圖時,明顯改善點圖存在的缺點。

           

          3.密度圖(Density plot)

          密度圖不僅能夠表示一個標記的表達水平,還能顯示給定區域中事件的相對數量(密度)。有三種密度圖。密度度、斑馬線圖、偽彩圖。選擇自己一種喜歡的應用

           

           

           

           

          4.等高線圖(Contour plots)

          等高線圖是另一顯示數據密度的形式。該圖使用等高線顯示數據的相對強度。等高線的每條線包含events的百分比由所用軟件的等高線圖決定。單純的等高線圖不能顯示低密度的群體顆?;蛘弋惓V?,比較好的策略為等高線圖與點圖結合起來使用,比如下圖左邊為點圖,中間為等高線圖,左邊為等高線加點圖。

           

           

           

           

          分析,建議用散點圖用直方圖不能說錯,但這需要在沒有自發熒光或自發熒光低、熒光滲漏調整到位的情況下。而在實際檢測中,自發熒光總是難以避免,更不用說現在多色流式中熒光滲漏對通道的干擾。

          通過下面這個圖可以明顯看出,在直方圖上,自發熒光造成的拖尾,使得你的陰陽性分界位置難以確定,即使GFP樣本能夠形成雙峰,但實際上雙峰分界位置同時包括了自發熒光假陽性信號、陽性群弱表達信號,這兩部分信號數量一樣的時候,這個位置恰好相互抵消,但如果不一樣的,這個比例就不準確了,如果改用下面的散點圖,用不規則門(如下面的梯形門),就可以準確圈出陽性群,呈現更真實的比例:

           

          綜上,不同類型的流式圖各有優缺點,適用于不同類型的檢測。

          掃一掃,關注微信
          地址:上海市,浦東新區,懿行路(微信和手機號同號) 傳真:86-021-68969289
          ©2024 上海滬崢生物科技有限公司 版權所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備16008355號-1
          国产精品亚洲产品一区二区三区,国产裸体歌舞一区二区,人妻丰满熟妇av无码区,综合乱伦日本亚洲
          <form id="jl9dl"></form>
              <menuitem id="jl9dl"><rp id="jl9dl"></rp></menuitem>

                <strike id="jl9dl"></strike>

                <span id="jl9dl"><pre id="jl9dl"><ol id="jl9dl"></ol></pre></span>

                  <strike id="jl9dl"></strike>