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          脂肪氧化酶活性測定

          更新時間:2020-08-28      點擊次數:1626

          一、蛋白質 鹽析分離的原理:

                蛋白質在稀鹽溶液中溶解度會隨著鹽濃度的增大而上升(鹽溶),當鹽濃度增大到一定數值時,其溶解度又逐漸下降直至蛋白質析出。鹽析的發生是由于鹽濃度增大到一定數值時使水活性降低,導致蛋白質分子 表面電荷逐漸被中和,水化膜逐漸被破壞,引起蛋白質分子之間相互聚集并從溶液中析出,后經離心機 分離后獲得沉淀物和上清液。

          二、影響蛋白 質鹽析分離的因素:

                1、蛋白質濃度 :

                蛋白質濃度過大,鹽析時發生共沉現象,分離效果不好。蛋白質濃度太稀,耗鹽量過大,蛋白質回收率低。一般蛋白質濃度在2.5%~3.0%較適中。

                2、離子強度:

                離子強度越大,蛋白質的溶解度越低,越容易產生鹽析現象。

                3、離子類型:

                離子半徑小而價數高的離子,對鹽析影響較強。離子半徑大而價數低的離子,對鹽析影響較弱。

                4、PH值:

                蛋白質所帶凈電荷越多,溶解度越大。凈電荷為零時,溶解度低。一般將PH值調到蛋白質等電點附近,這樣有利于鹽析。

                5、溫度:

                低離子強度或水中,在一定范圍內蛋白質的溶解度隨著溫度的升高而增大。高鹽溶液中,蛋白質的溶解度隨著溫度的升高有時反而下降。一般情況下在0~4℃操作

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